Vostok 1 được thiết kế để chở một phi hành gia. Yuri Gagarin, 27 tuổi, đã được chọn làm phi công lái Vostok 1. Những nhiệm vụ bầu chọn phi hành gia chính thức được thực hiện vào ngày 8 tháng tư, tức bốn ngày trước khi sứ mệnh và Gagarin đã được yêu thích nhất giữa các phi hành gia ứng cử viên cho ít nhất là vài năm.[1]

Quyết định cuối cùng của những người sẽ bay sứ mệnh chủ yếu dựa trên quan điểm của người đứng đầu của phi hành gia đào tạo bay, Nikolai Kamanin. Trong tháng 5 Kamanin đã viết rằng ông vẫn chưa quyết định được giữa Gagarin và Titov.[2] "Điều duy nhất mà tôi không thể chọn Titov là cần phải có người mạnh mẽ cho một ngày chuyến bay."[3] Kamanin đã đề cập đến những nhiệm vụ thứ hai, Vostok 2, so với tương đối ngắn duy nhất-quỹ đạo sứ mệnh của Vostok 1. Khi Gagarin và Titov đã được thông báo quyết định trong một cuộc họp vào ngày 9, Gagarin đã rất hạnh phúc, và Titov đã thất vọng.[4] Vào ngày 10 tháng tư này, cuộc họp đã được tái diễn trước máy quay truyền hình, do đó nó sẽ là tâm điểm chú ý của các sự kiện. Bao gồm một bài phát biểu chấp nhận bởi Gagarin.[5] Như là một dấu hiệu của mức độ bí mật liên quan, một trong các phi hành gia ứng cử viên, Alexei, sau này nhớ lại rằng ông không biết những người được chọn cho những nhiệm vụ cho đến khi sau khi chuyến bay vũ trụ đã bắt đầu.[6]